其他實驗服務細胞實驗

細胞培養(yǎng)

其他實驗服務細胞實驗

價格￥2000
單位批
貨號HKF6001
品牌浩克

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服務介紹：

貨號	名稱	規(guī)格	價格
HKF6001	細胞培養(yǎng)	批	2000元

　簡介：
　　細胞培養(yǎng)是采用無菌操作的方法，模擬動物體內(nèi)的生理條件，在體外進行培養(yǎng).使其不斷地生長、繁殖，從而觀察細胞的增殖、分化以及細胞衰老等過程的生命現(xiàn)象。常見的細胞培養(yǎng)方式可分為貼壁和懸浮兩種。細胞培養(yǎng)的常規(guī)操作包括：
1)細胞的接種和傳代
2)細胞計數(shù)
3)細胞的復蘇和凍存。
細胞培養(yǎng)方法：
　　1、完全培養(yǎng)基配置：培養(yǎng)基的配制(需在超凈臺內(nèi)無菌操作)：10%FBS+90%培養(yǎng)基(根據(jù)細胞的種類分為DMEM/F12、DMEM/HIGH、
MEM/EBSS、改良型RPMI-1640培養(yǎng)基)。
　　2、細胞復蘇：
a. 把凍存管從液氮中取出來，立即投入37℃水浴鍋中，輕微搖動。液體都融化后(大概1-1.5分鐘)，拿出來噴點酒精放到超凈工作臺里。
b.把上述細胞懸液吸到裝10ml培養(yǎng)基15ml的離心管中(用培養(yǎng)基把凍存管洗一遍，把粘在壁上的細胞都洗下來)，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘。
c.把上清液倒掉，加1ml培養(yǎng)基把細胞懸浮起來。吸到裝有10ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中前后左右輕輕搖動，使培養(yǎng)瓶中的細胞均勻分布。
d.標好細胞種類和日期等，放到CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細胞貼壁后換培養(yǎng)基。
e. 3天換一次培養(yǎng)基。
　　3、細胞傳代：
a. 培養(yǎng)瓶中的細胞覆蓋率達到80%-90%時要傳代。
b.把原有培養(yǎng)基吸掉。
c.加適當?shù)囊鹊鞍酌?能覆蓋細胞就行)，消化1-2分鐘。
d.細胞都變圓后吸出胰酶終止消化。
e.加入20ml的完全培養(yǎng)基，移液槍吹打細胞，把細胞都懸浮起來。
f.根據(jù)細胞種類把細胞傳到幾個培養(yǎng)瓶中。一般，癌細胞分4個，正常細胞傳3個。繼續(xù)培養(yǎng)。
　　4、細胞凍存：
把細胞消化下來并離心(同上)。用配好的凍存液把細胞懸浮起來，分裝到滅菌的凍存管中，靜止幾分鐘，寫明細胞種類，凍存日期。
4℃30min，-20℃30min，-80℃過夜，然后放到液氮罐中保存。
凍存液的配制：70%的完全培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO. DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

樣本寄送須知：

　　1.活細胞：一定要不透氣方瓶寄，常溫;

　　2.凍存細胞：純干冰件，保證干冰充足

無

暫無

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說明書.pdf

　常用的細胞培養(yǎng)基：

名稱	成份	適用細胞類型	備注
MEM	BSS＋12種氨基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素	各種傳代細胞系和原代細胞	在此基礎上改良的培養(yǎng)基有BEM、DMEM
DMEM	改良自MME，各成分量加倍	貼附型腫瘤細胞，CHO細胞	分低糖（5.5mM）、高糖（25mM）型，高糖型較常用
RPMI-1640	BSS＋21種氨基酸＋維生素11種等	懸浮細胞，正常細胞，腫瘤細胞	最初針對淋巴細胞設計
L15	半乳糖替代了葡萄糖;磷酸鹽緩沖體系	快速增殖瘤細胞，CO2缺乏	以半乳糖代替了葡萄糖
McCoy5A	BSS＋40種成分	原代細胞，淋巴細胞，組織活檢細胞	最初為肉瘤細胞設計
DMEM/F12	高濃度與成分多樣化	原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系	F12與DMEM等體積混合，可作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎配方

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